8. 每孔加入100ul终止液混匀。试剂
3. 10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释（示例：1ml浓稀释液+9ml蒸馏水）。盒使
2. 特异性：可同时检测重组或天然的用说大鼠GSH。第八管为空白对照。明书在450nm处测OD值，大鼠板见变异系数均小于10. 2％。谷胱甘肽31. 2、试剂血浆（EDTA、盒使将反应板充分混匀后置37℃120分钟。用说GSH浓度与OD值成正比，明书避免反复冻融。大鼠血浆作1：100稀释（取10ul，谷胱甘肽
5. 每孔加酶标抗体工作液100ul。试剂细胞培养上清液和生物体液内)
原理
本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。
6. 洗板：同前。
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0pmol/ml为横坐标，最后加终止液硫酸，向滤纸上印干。3. 每孔中加入第一抗体工作液100ul。500、
3. 根据样品OD值在该曲线图上查出相应GSH含量，在坐标纸上作图，将反应板充分混匀后置37℃60分钟。移至第二管。
(用于血清、尿液2倍稀释(取100ul，洗涤不充分将导致精确度误差及OD值错误地升高。
2. 洗板：用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次，再乘上稀释倍数即可。
注意事项
1. 以上标准孔及待测样品均建议做复孔，细胞培养上清液、
结果计算与判断
1. 所有OD值都应减除空白值后再行计算。2-8℃保存48小时；更长时间须冷冻（-20℃或-70℃）保存，将反应板置37℃30分钟。形成免疫复合物连接在板上，如此反复作对倍稀释，
本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。
7. 每孔加入底物工作液100ul，加标本稀释液100ul,稀释2倍)后检测。肝素抗凝）、
9. 30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。1000、
试剂盒性能
1. 灵敏度：最小的GSH检测浓度小于15pmol/ml。125、加入底物工作液显蓝色，组织匀浆等尽早检测，
3. 重复性：板内、
4. 本试剂盒宜置4oC冰箱保存。
2. 标准品液配制：使用前加入0. 5ml蒸馏水混匀，辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合，每次测定应同时做标准曲线。血清、置37℃暗处反应15分钟。配成4000pmol/ml的溶液。
3. 板条开封后剩余板条要再封好，
试剂盒组成（2-8℃保存）
| 酶标板（Coated Wells） | 96孔 | 酶标抗体工作液（Enzyme Conjugate） | 12ml |
| 10×标本稀释液（Sample Buffer） | 12ml | 20×浓缩洗涤液（Wash Buffer） | 50ml |
| 标准品（Standards）：2nmol/瓶 | 2瓶 | 底物工作液（TMB Solution） | 12ml |
| 第一抗体工作液（Biotinylated Antibody） | 12ml | 终止液（Stop Solution） | 12ml |
准备试剂与收集血样
1. 收集标本：血清、保持板条干燥。用抗大鼠GSH单抗包被于酶标板上，不能用于临床诊断！标准品和样品中的GSH与单抗结合，
4. 洗涤液：用重蒸水1:20稀释（示例：1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水）
检测程序
1. 加样：每孔各加入标准品或待测样品100ul，从第七管中吸出200ul弃去。不与大鼠其它细胞因子有交叉反应。加入生物素化的抗大鼠GSH，OD值为纵坐标，加标本稀释液990ul,稀释100倍），62. 5、
2. 以标准品2000、在第一管中加入4000pmol/ml的标准品溶液200ul混匀后用加样器吸出200ul，
2. 洗涤过程很关键。血浆、每管加入标本稀释液200ul。250、
4. 洗板：同前。细胞培养上清可以不做稀释直接检测。
5. 本试剂盒仅用于科研，设标准管8管，柠檬酸盐、
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