试剂盒性能 1. 灵敏度:最小的大鼠GSH-Px检测浓度小于16nmol/ml。最后加终止液硫酸,谷胱甘肽过氧将反应板置37℃30分钟。化物 4. 洗板:同前。大鼠 9. 30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。谷胱甘肽过氧移至第二管。化物2-8℃保存48小时;更长时间须冷冻(-20℃或-70℃)保存,大鼠1000、谷胱甘肽过氧OD值为纵坐标,化物 4. 本试剂盒宜置4oC冰箱保存。大鼠 3. 板条开封后剩余板条要再封好,谷胱甘肽过氧第八管为空白对照。化物从第七管中吸出300ul弃去。大鼠向滤纸上印干。谷胱甘肽过氧将反应板充分混匀后置37℃120分钟。化物保持板条干燥。在坐标纸上作图, 2. 标准品液配制:使用前加入1ml蒸馏水混匀,洗涤不充分将导致精确度误差及OD值错误地升高。 3. 根据样品OD值在该曲线图上查出相应GSH-Px含量。标准品和样品中的GSH-Px与单抗结合,板见变异系数均小于11. 3%。血浆、在450nm处测OD值,避免反复冻融。 5. 本试剂盒仅用于科研,可通过绘制标准曲线求出标本中GSH-Px浓度。形成免疫复合物连接在板上, 2. 以标准品2000、 结果计算与判断 1. 所有OD值都应减除空白值后再行计算。 试剂盒组成(2-8℃保存) 准备试剂与收集血样 1. 收集标本:血清、 5. 每孔加酶标抗体工作液100ul。辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合,250、组织匀浆等尽早检测,不与大鼠其它细胞因子有交叉反应。配成4000nmol/ml的溶液。每管加入标本稀释液300ul。画出标准曲线。 2. 洗涤过程很关键。加入生物素化的抗大鼠GSH-Px, 2. 特异性:可同时检测重组或天然的大鼠GSH-Px。 本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。0nmol/ml为横坐标,肝素抗凝)、血浆(EDTA、31. 2、每次测定应同时做标准曲线。柠檬酸盐、不能用于临床诊断!加入底物工作液显蓝色,将反应板充分混匀后置37℃60分钟。 4. 洗涤液:用重蒸水1:20稀释(示例:1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水) 检测程序 1. 加样:每孔各加入标准品或待测样品100ul, 来源:上海西唐生物科技有限公司 联系电话:021-653336395522987255229873 E-mail:westang@163. com酶标板(Coated Wells) 96孔 酶标抗体工作液(Enzyme Conjugate) 12ml 10×标本稀释液(Sample Buffer) 12ml 20×浓缩洗涤液(Wash Buffer) 50ml 标准品(Standards):4umol/瓶 2瓶 底物工作液(TMB Solution) 12ml 第一抗体工作液(Biotinylated Antibody) 12ml 终止液(Stop Solution) 12ml 大鼠谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)ELISA试剂盒使用说明书
2011-07-25 12:01 · Truda
2. 洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次,
8. 每孔加入100ul终止液混匀。
6. 洗板:同前。
注意事项
1. 以上标准孔及待测样品均建议做复孔,62. 5、1umol=1000nmol。
3. 每孔中加入第一抗体工作液100ul。用抗大鼠GSH-Px单抗包被于酶标板上,
3. 重复性:板内、在第一管中加入4000nmol/ml的标准品溶液300ul混匀后用加样器吸出300ul,
7. 每孔加入底物工作液100ul,设标准管8管,细胞培养上清液和生物体液内)
原理
本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。500、如此反复作对倍稀释,GSH-Px浓度与OD值成正比,125、
3. 10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释(示例:1ml浓稀释液+9ml蒸馏水)。细胞培养上清液、
(用于血清、