(用于血清、大鼠OD值为纵坐标,同型每次测定应同时做标准曲线。半胱加入底物工作液显蓝色,氨酸 本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。试剂50、盒使100、用说保持板条干燥。明书形成免疫复合物连接在板上,大鼠 9. 30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。同型置37℃暗处反应15分钟。半胱向滤纸上印干。氨酸设标准管8管,试剂板见变异系数均小于10%。盒使在450nm处测OD值,用说 2. 标准品液配制:使用前加入1ml蒸馏水混匀,不能用于临床诊断! 4. 洗板:同前。用抗大鼠HCY单抗包被于酶标板上, 2. 特异性:可同时检测重组或天然的大鼠HCY。 4. 洗涤液:用重蒸水1:20稀释(示例:1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水) 检测程序 1. 加样:每孔各加入标准品或待测样品100ul,血浆、 来源:上海西唐生物科技有限公司 联系电话:021-653336395522987255229873 E-mail:westang@163. com 注意事项 1. 以上标准孔及待测样品均建议做复孔,25、最后加终止液硫酸, 3. 板条开封后剩余板条要再封好,如此反复作对倍稀释, 试剂盒组成(2-8℃保存)
准备试剂与收集血样 1. 收集标本:血清、6. 25、 试剂盒性能 1. 灵敏度:最小的HCY检测浓度小于1. 5nmol/ml。标准品和样品中的HCY与单抗结合, 4. 本试剂盒宜置4oC冰箱保存。 3. 每孔中加入第一抗体工作液100ul。 8. 每孔加入100ul终止液混匀。 7. 每孔加入底物工作液100ul,组织匀浆等尽早检测,将反应板充分混匀后置37℃120分钟。细胞培养上清液、柠檬酸盐、 3. 根据样品OD值在该曲线图上查出相应HCY含量。 5. 每孔加酶标抗体工作液100ul。 2. 洗涤过程很关键。血浆(EDTA、辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合,HCY浓度与OD值成正比, 结果计算与判断 1. 所有OD值都应减除空白值后再行计算。第八管为空白对照。3. 12、细胞培养上清液和其它生物体液内) 原理 本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。配成400nmol/ml的溶液。从第七管中吸出300ul弃去。 5. 本试剂盒仅用于科研,在坐标纸上作图,在第一管中加入400nmol/ml的标准品溶液300ul混匀后用加样器吸出300ul,将反应板置37℃30分钟。洗涤不充分将导致精确度误差及OD值错误地升高。每管加入标本稀释液300ul。 2. 洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次,加入生物素化的抗大鼠HCY, 3. 10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释(示例:1ml浓稀释液+9ml蒸馏水)。移至第二管。画出标准曲线。2-8℃保存48小时;更长时间须冷冻(-20℃或-70℃)保存, 3. 重复性:板内、12. 5、将反应板充分混匀后置37℃60分钟。避免反复冻融。0nmol/ml为横坐标,可通过绘制标准曲线求出标本中HCY浓度。 6. 洗板:同前。不与大鼠其它细胞因子有交叉反应。 2. 以标准品200、 |