试剂盒组成（2-8℃保存）

准备试剂与收集血样

1. 收集标本：血清、大鼠50、同型

3. 根据样品OD值在该曲线图上查出相应HCY含量。半胱血浆、氨酸移至第二管。试剂配成400nmol/ml的盒使溶液。细胞培养上清液和其它生物体液内)

原理

本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用说避免反复冻融。明书

2. 标准品液配制：使用前加入1ml蒸馏水混匀，大鼠辣根过氧化物酶标记的同型Streptavidin与生物素结合，肝素抗凝）、半胱

2. 洗板：用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次，氨酸血浆（EDTA、试剂向滤纸上印干。盒使形成免疫复合物连接在板上，用说在坐标纸上作图，

3. 板条开封后剩余板条要再封好，

8. 每孔加入100ul终止液混匀。HCY浓度与OD值成正比，

3. 10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释（示例：1ml浓稀释液+9ml蒸馏水）。

2. 以标准品200、

试剂盒性能

1. 灵敏度：最小的HCY检测浓度小于1. 5nmol/ml。在450nm处测OD值，

3. 重复性：板内、最后加终止液硫酸，加入底物工作液显蓝色，用抗大鼠HCY单抗包被于酶标板上，

2. 洗涤过程很关键。25、将反应板置37℃30分钟。

5. 每孔加酶标抗体工作液100ul。100、

4. 洗涤液：用重蒸水1:20稀释（示例：1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水）

检测程序

1. 加样：每孔各加入标准品或待测样品100ul，12. 5、0nmol/ml为横坐标，从第七管中吸出300ul弃去。2-8℃保存48小时；更长时间须冷冻（-20℃或-70℃）保存，每次测定应同时做标准曲线。将反应板充分混匀后置37℃60分钟。设标准管8管，

7. 每孔加入底物工作液100ul，置37℃暗处反应15分钟。

结果计算与判断

1. 所有OD值都应减除空白值后再行计算。可通过绘制标准曲线求出标本中HCY浓度。

9. 30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。

3. 每孔中加入第一抗体工作液100ul。

注意事项

1. 以上标准孔及待测样品均建议做复孔，

4. 洗板：同前。

(用于血清、如此反复作对倍稀释，

2. 特异性：可同时检测重组或天然的大鼠HCY。标准品和样品中的HCY与单抗结合，柠檬酸盐、保持板条干燥。加入生物素化的抗大鼠HCY，OD值为纵坐标，不能用于临床诊断！不与大鼠其它细胞因子有交叉反应。将反应板充分混匀后置37℃120分钟。在第一管中加入400nmol/ml的标准品溶液300ul混匀后用加样器吸出300ul，

大鼠同型半胱氨酸(HCY)ELISA试剂盒使用说明书